Иммунитет после антирабической прививки

Антирабические прививки (греческий anti- против + латинский rabies бешенство; синоним пастеровские прививки) – введение специфических препаратов (вакцины, сыворотки, гамма-глобулина) для профилактики бешенства.

Метод лечебно-профилактических прививок против бешенства (см.) был предложен в 1885 году Луи Пастером (см.), создавшим первую антирабическую вакцину. В основу метода был положен принцип многократного повторного введения приготовленной из мозга кролика вакцины, содержащей возрастающие количества живого, так называемого фиксированного вируса бешенства, вызывавшего развитие заболевания у экспериментальных животных (кроликов) через строго определенный интервал времени после их заражения.

Инактивация вируса достигалась высушиванием кусочков мозга зараженных кроликов над едким кали в течение различного периода времени (от 1 до 16 суток). Прививки начинались с введения мозговой суспензии вируса, утратившего вирулентность, и последующего ежедневного введения вакцины, содержавшей возрастающие количества живого вируса. Эффективность метода была проверена на собаках.

6 июля 1885 года Пастер впервые начал курс прививок 9-летнему ребенку, искусанному бешеной собакой. Лечение было начато через 60 часов после укусов и продолжалось в течение 10 дней, за это время сделано 13 прививок. Прививки были начаты с введения суспензии мозга кролика (16-дневной сушки), не содержащей живого вируса, и закончены введением вирулентного вируса (мозг однодневной сушки). Ребенок остался жив. Вскоре пастеровские прививки получили широкое признание. Через год в России была открыта вторая после французской пастеровская станция (см. Пастеровские станции, пункты).

Вслед за открытием Пастера были предложены различные методы прививок, отличавшиеся от пастеровских более совершенной технологией приготовления антирабических вакцин. Наиболее короткий курс вакцинации (не более 6 дней) с повторными инъекциями вакцины в течение одного дня был связан с применением эфирных вакцин (метод Хемпта, 1925).

Схемы антирабических прививок, и в том числе при применении вакцины Пастера, многократно модифицировались по причине недостаточно высокой эффективности в случаях массивного инфицирования (множественные укусы, особенно в голову).

Повысить эффективность антирабических прививок удалось в 50-х годах 20 века, когда был разработан метод комбинированного лечения – введение очищенной и концентрированной гипериммунной антирабической сыворотки или ее глобулиновой фракции, полученной из сыворотки крови животных разных видов (чаще лошади) с последующим курсом прививок антирабической вакциной. В СССР применяется антирабический гамма-глобулин, приготовленный из сыворотки лошади.

Антирабические прививки при наличии показаний назначаются врачом всем лицам независимо от возраста и начинаются немедленно. Продолжительность курса прививок, суточная доза вакцины определяются совокупностью ряда факторов: состоянием покусавшего животного, тяжестью и локализацией нанесенного повреждения, возрастом пострадавшего, эпизоотической обстановкой.

Полный курс прививок по безусловным показаниям назначают при укусах, царапинах, ослюнении слизистых и кожных покровов явно бешеным или подозрительным на бешенство животным, а также внешне здоровыми животными, за судьбой которых нельзя проследить (дикие животные, бродячие собаки и кошки). Это обусловлено тем, что в слюне животных вирус бешенства обнаруживается за 3 суток до развития заболевания. Прививки проводят также при ослюнении и повреждениях, нанесенных человеком, страдающим гидрофобией, при ранении предметами, загрязненными слюной больных бешенством, трупным материалом погибших от бешенства животных и людей.

Основным критерием при определении курса прививок в указанных случаях является тяжесть укуса и его локализация. При множественных укусах тела, при любых укусах наиболее опасной локализации (лицо, голова, шея, пальцы рук), ослюнении поврежденных слизистых оболочек, при любых укусах, нанесенных дикими плотоядными животными (волки, лисы, шакалы и др.), назначают комбинированные прививки – однократное введение антирабической сыворотки или гамма-глобулина с последующим курсом прививок антирабической вакциной. Антирабический гамма-глобулин вводят в ягодичные мышцы после предварительной проверки чувствительности пострадавшего к белкам сыворотки лошади и десенсибилизации организма. Доза гамма-глобулина 0,25-0,5 мл на 1 кг веса тела. В СССР принят курс, предусматривающий ежедневные прививки 5% мозговой вакциной продолжительностью не более 25 дней с 2-3 ревакцинациями с интервалом в 10 дней после окончания основного курса. Суточная доза вакцины для взрослого человека составляет 5 мл, вводится она в подкожную клетчатку живота по 2,5 мл с интервалом в 30 минут. Эти комплексные антирабические прививки при массивном инфицировании применяются во всех странах, с той лишь разницей, что общая продолжительность основного курса прививок и суточная доза вакцины при применении вакцин разных типов варьируют. При легких одиночных укусах любой части тела (кроме лица, головы, шеи, кистей рук), при ослюнении неповрежденных слизистых оболочек, поврежденной и неповрежденной кожи применяется только курс вакцинации продолжительностью не более 20 дней с суточной дозой вакцины, равной 2-3 мл.

При множественных укусах, укусах в голову, лицо, пальцы рук внешне здоровыми известными животными назначают условный курс прививок, вводят только антирабический гамма-глобулин (0,25 мл на 1 кг веса тела) или антирабическую вакцину (5 мл в течение 3-4 дней). За животным устанавливают 10-дневное ветеринарное наблюдение. При заведомо неблагоприятной ситуации (укус не спровоцирован, животное не привито, местность эпизоотически неблагополучна по бешенству) условный курс прививок может быть проведен и при более легких укусах. Если животное остается здоровым в течение 10 дней, то курс прививок не продолжают. Если же животное заболеет бешенством, исчезнет или погибнет от неизвестных причин, прививки продолжают, а в случаях, где их назначение не предусматривалось в момент контакта с животным, немедленно назначается полный курс.

Детям назначается меньшая, чем взрослым, доза вакцины. Курс прививок по безусловным показаниям лицам с тяжелыми укусами, лицам с аллергическими заболеваниями и заболеваниями центральной нервной системы, грудным детям, беременным женщинам проводят в условиях стационара.

Во время проведения прививок и после их окончания необходимо соблюдать определенный режим: категорически запрещено употреблять спиртные напитки, следует избегать переутомления, перегревания, охлаждения; лечебные сыворотки (кроме противостолбнячной) могут быть назначены только по витальным показаниям.

При введении антирабических вакцин наряду с местной воспалительной кожной реакцией в редких случаях может развиться шок, нейропаралитические осложнения (см. Поствакцинальные осложнения). При первых признаках поражения ц. н. с. прививаемого немедленно госпитализируют. При введении гетерологичных антирабических сывороточных препаратов анафилактоидные реакции наблюдаются в 15-20% случаев. В СССР и США разрабатывается ареактогенный препарат – антирабический иммуноглобулин из человеческой сыворотки, который находится в стадии испытания.

Антирабические прививки в СССР проводятся в соответствии с существующим наставлением но применению антирабической вакцины и антирабического гамма-глобулина, где предусмотрены как курс прививок при поражениях различной тяжести, так и методы лечения поствакцинальных осложнений.

Профилактические прививки собакам и кошкам проводятся работниками ветеринарной службы; для поддержания напряженного иммунитета животных прививают ежегодно однократным введением вакцины. Такие прививки являются одной из действенных мер против заноса бешенства из природных очагов инфекции (от диких животных).

С целью индивидуальной защиты рекомендуются профилактические антирабические прививки лабораторным работникам, работающим с уличным вирусом бешенства, ветеринарным работникам, лицам, ведущим отлов бродячих собак и кошек, и др.

Антирабические вакцины

В 1885 году Луи Пастер и его сотрудники Шамберлан, Ру и Тюйе (C.Chamberland, E. Roux, L. F. Thuillier) предложили использовать в качестве вакцинного штамма вариант возбудителя бешенства (адаптированный к центральной нервной системе кроликов путем проведения 90 последовательных внутримозговых пассажей), который был назван фиксированным вирусом.

В отличие от уличного вируса бешенства, фиксированный вирус с большим постоянством вызывал заболевание у кроликов при интрацеребральном введении после короткого инкубационного периода (7 дней), более активно размножался в мозге, почти утратил свои патогенные свойства при подкожном введении. Штамм Пастера был предоставлен различным странам для производства антирабических вакцин. В наст, время оригинальный штамм и особенно его ответвления (подштаммы) прошли многочисленные пассажи на кроликах. Подштаммы вируса Пастера претерпели некоторые изменения биологических свойств, инкубационный период болезни у кроликов сократился до 4 суток, в антигенном отношении сохранилось единство с циркулирующим в природе уличным вирусом. С целью сохранения стабильных свойств штамма Пастера рекомендуется максимально сокращать число последовательных пассажей.

Для производства современных мозговых вакцин применяют оригинальный штамм Пастера и сходные с ним штаммы, фиксированные и поддерживаемые внутримозговыми пассажами на кроликах. Фиксированный вирус может храниться в лабораторных условиях в 50% нейтральном глицерине или в виде замороженной или высушенной суспензии.

Вакцины готовят из мозга кроликов, молодых овец, коз, из мозга новорожденных белых мышей и кроликов. Считалось, что вакцины из мозга новорожденных животных не содержат так называемый энцефалитогенный фактор, являющийся одной из причин развития поствакцинальных неврологических осложнений. Вакцины из мозга новорожденных животных менее реактогенны, но их применение не исключает полностью возможности развития поствакцинальных осложнений.

Копровский и Кокс (H. Koprowski, Н. Сох) в 1948 году предложили новый вакцинный штамм «Флюри» («Flury»), фиксированный на однодневных цыплятах и адаптированный и модифицированный на тканях развивающегося куриного эмбриона. Существует две модификации штамма «Флюри» – штамм 40-50-го пассажа и штамм, прошедший 180 пассажей. Позже был предложен второй эмбриональный штамм – «Келев» («Kelev»). Штаммы поддерживают на куриных эмбрионах, зараженных в желточный мешок взвесью из ткани куриного зародыша, и используют для приготовления живых вакцин для профилактической вакцинации животных.

Пауэлл и Калбертсон (Н. Powell, С. Culbertson, 1950) адаптировали фиксированный вирус бешенства к тканям развивающегося утиного эмбриона заражением в желточный мешок.

Фенье (Р. Fenje, 1960) путем чередующихся пассажей па белых мышах и культуре клеток почки сирийского хомяка адаптировал к этой культуре полученный им вариант фиксированного вируса – штамм «Сад» («Sad»), предложил его в качестве вакцинного вируса и показал возможность получения культуральной вакцины. В последующем штамм «Сад» был адаптирован к культуре клеток почек свиньи; он получил название – штамм «ЭРА» («ERA»). Вторым вариантом штамма «Сад» является штамм «Внуково-32», который был получен в результате проведения дополнительных пассажей в первичной культуре клеток почки сирийского хомяка при пониженной температуре культивирования – 32°. Известно несколько вакцинных штаммов, полученных на различных тканевых культурах животного происхождения, которые используются для получения культуральных вакцин, применяющихся в ветеринарной практике. Наиболее эффективной считают вакцину, приготовленную из штамма «ЭРА». В последние годы фиксированный вирус адаптирован к культуре диплоидных клеток человека (WI-38).

Культуральные вакцины для иммунизации людей разрабатываются и находятся в стадии внедрения. В СССР вакцину готовят в первичной культуре клеток почки сирийского хомяка, зараженной штаммом «Внуково-32». Наиболее перспективными считают очищенные и концентрированные культуральные вакцины, приготовленные на диплоидных клетках человека.

Все вакцины делят на два основных типа: живые и инактивированные. Любая вакцина может быть приготовлена в лиофилизированной форме, что обеспечивает стабильность свойств препарата при длительном хранении. В медицинской практике инактивированные препараты в связи с большей безопасностью их применения практически вытеснили живые вакцины.

Живые вакцины

Оригинальная вакцина Пастера. Вакцину готовят из спинного мозга кролика, забитого в агональном состоянии. Спинной мозг извлекают целиком в строго асептических условиях, разрезают на несколько частей и подвешивают в закрытых флаконах, на дне которых содержится едкий калий, поглощающий влагу. Высушивание в этих условиях в течение 2-14 дней сопровождается прогрессивно убывающим содержанием живого вируса до полной его инактивации. В 1891 году метод модифицирован Кальметтом (A. Calmette). После 3-4-дневной сушки мозг помещали в сосуды с 20 мл нейтрального глицерина и стерилизовали в автоклаве при t° 120°, сохраняли в глицерине не более 40 дней и использовали для приготовления вакцины. Эта модификация применялась в институте Пастера с 1911 по 1952 годы.

Вакцина Хедьеша [Е. (А.) Högyes, 1887]. В качестве прививочного препарата вводили взвесь вируссодержащего мозга кролика, приготовленную ex tempore на физиологическом растворе в возрастающей концентрации от 1 : 10 000 до 1 : 100 (так называемый дилюционный метод). Преимуществом метода автор считал более точную дозировку вируса во вводимом материале.

Инактивированные вакцины

Антирабические вакцины, инактивированные действием химических агентов. Феноловые вакцины. Ферми (С. Fermi, 1908) предложил использовать фенол с целью инактивации фиксированного вируса. Автор показал, что воздействие небольших концентраций фенола при разных температурных режимах в течение различного времени на мозговую суспензию может инактивировать фиксированный вирус, не изменяя существенно его иммуногенную активность. В настоящее время применяют вакцины, которые отличаются по температурному режиму инактивации и количественному содержанию фенола.

1.Вакцина Ферми. Готовят тщательно гомогенизированную суспензию мозга овцы, кролика на физиологическом растворе, содержащем 1% фенола, и выдерживают ее в термостате при t° 22° в течение 24 часов. В конечном продукте содержится 5% мозговой взвеси и 0,5% фенола. В СССР применяются феноловые вакцины типа Ферми, приготовленные из мозга овец. Вирус инактивируют 1% фенолом при ta 22° в течение 14 дней. Выпускают только лиофилизированные препараты. Перед употреблением вакцину разводят в 3 мл растворителя. Готовый препарат содержит 5% суспензии мозгового вещества с небольшим количеством фенола (не более 0,25%), сахарозы, к-рую добавляют в качестве стабилизатора. Вакцина содержит небольшое количество живого вируса. Применяется также полностью инактированная фенолвакцина из мозга овец и фенолвакцина, полученная в первичной культуре клеток почки сирийского хомяка.

2. Вакцина Семпла (D. Semple, 1917). По оригинальному методу готовилась 8% суспензия мозга кролика с 1% содержанием фенола, которую выдерживали в термостате 24 часа при t° 37σ. Перед употреблением разводили в 2 раза физиологическим раствором. Конечный продукт содержал 4% мозгового вещества и 0,5% фенола.

В настоящее время выпускают вакцины, приготовленные из мозга кролика, овец, коз, содержащие различное количество мозгового вещества и меньшее (по сравнению с оригинальным методом) количество фенола. Полная инактивация вируса достигается более длительной инкубацией мозговой суспензии в присутствии фенола при ta 20-30°. К вакцине добавляют 0,01% тиомерзала. При иммунизации вводят не менее 2 мл 5% мозговой суспензии.

Этеризоваиные, или эфирные, вакцины. Ремленже (R. Remlinger, 1919) впервые использовал эфир для инактивации фиксированного вируса. Хемпт (А. Hempt, 1925) модифицировал метод и предложил частично и полностью инактивированную вакцину. Головной мозг кролика сначала выдерживали в эфире в течение 90 часов, спинной – 72 часа, а затем в фено-лизированном глицерине (33% глицерина, 1% фенола) в течение 20 дней.

В настоящее время этеризованные вакцины готовят из мозга овец. Кусочки мозга, обработанные эфиром, выдерживают в фенолизированном глицерине не менее полутора месяцев. По модификации Николича (М. Nikolic) мозг дополнительно инактивируют 48 часов в 1%формалине. Вакцину готовят на дистиллированной воде, обычно в виде 9-10% суспензии, содержащей 0,5% фенола.

Эмбриональная вакцина. Готовят 33% суспензию из ткани развивающегося утиного эмбриона, зараженного в желточный мешок, инактивируют бета-пропиолактоном. Вакцина менее реактогенна, но и менее иммуногенна сравнительно с мозговыми вакцинами. Бета-пропиолактон используют также для инактивации мозговых вакцин.

Антирабические вакцины, инактивированные физическими воздействиями. Бабеш и Пушкариу (V. Babes, E. Puscariu) впервые предложили вакцину различной степени инактивации, что достигалось прогреванием 1% мозговой взвеси при t° 65-45°.

В настоящее время с целью получения инактивированной вакцины применяют ультрафиолетовое облучение, которое вызывает мгновенную инактивацию вируса. Для производственных целей разработаны специальные приборы, которые обеспечивают непрерывный поток вируссодержащего материала в виде тонкой пленки и точную дозировку облучения. Инактивации может быть подвергнута суспензия, содержащая не более 10% ткани, предварительно профильтрованная через несколько слоев марли или проволочное сито. Если до употребления вакцину хранят в жидком состоянии, то добавляют консервант (тиомерзал в разведении 1 : 8000 или 0,25% фенол). Применяются облученные вакцины с различным содержанием мозгового вещества (1% вакцины из мозга новорожденных мышей, 5% – из мозга животных других видов).

Оценка качества вакцин

Все выпускаемые серии вакцин проходят обязательный контроль на стерильность, безвредность, содержание живого вируса и иммуногенность. Сухие антирабические вакцины контролируются на остаточную влажность и растворимость.

Существует три основных стандартных метода определения иммуногенности вакцин: два теста Хейбла (K. Habel) и метод (NH) национальных институтов здравоохранения США; последний является наиболее точным, применяется в СССР. Определение иммуногенности вакцин по методу NH производится в сопоставлении с эталонной национальной или международной вакциной.

В ветеринарной практике для профилактической иммунизации животных широко применяются живые эмбриональные, живые культуральные вакцины, мозговые вакцины, инактивированные фенолом, бетапропиолактоном, ультрафиолетовым облучением.

Библиография: Комитет экспертов ВОЗ по бешенству, пер. с англ., Сер. техн. докл., № 321, ВОЗ, Женева, 1967; Пастер Л. Избранные труды, пер. с франц., т. 2, с. 690, М., 1960; Шен Р. М. Антирабические вакцины, в кн.: Профилактика инфекций живыми вакцинами, под ред. М. И. Соколова, с. 103, М., 1960; Abelseth М. К. An attenuated rabies vaccine for domestic animals produced in tissue culture, Canad. vet. J., v. 5, p. 279, 1964; он же, Propagation of rabies virus in pig kidney cell culture, ibid., p. 84; Fenje P. A rabies vaccine from hamster kidneytissue cultures, Canad. J. Microbiol., v. 6, p. 605, 1960; Laboratory techniques in rabies, ed. by M. M. Kaplan a. H. Koprowski, WHO, Geneva, 1973.

Л. П. Горшунова.

Источник